我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样请问哪位大侠知道原因啊?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 02:25:28

我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样请问哪位大侠知道原因啊?
我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样
请问哪位大侠知道原因啊?

我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样请问哪位大侠知道原因啊?
跑胶哪能看的准,你测序了么,我觉得应该没问题.

这个应该问题不大啊~你跑胶用的参比的ladder条带要看清楚,别看错了位置。。。没准是你这个目的片段里面本身产生了一些二级结构,导致构像改变了,在胶上就跑的慢了~~参比的ladder没看错,测序结果表明确实扩增的产物比我目的片段大400bp,不知道咋回事用软件分析一下序列会不会产生稳定的发夹结构什么的。。。要是有的话肯定会跑的慢的~...

全部展开

这个应该问题不大啊~你跑胶用的参比的ladder条带要看清楚,别看错了位置。。。没准是你这个目的片段里面本身产生了一些二级结构,导致构像改变了,在胶上就跑的慢了~~

收起

1300,你跑多少浓度的胶?用多少的maker?不准很正常,搞清楚没错就好

我要扩增1200bp的目的片段,但跑胶后结果总是比我的目的带大300多bp,我以为是引物的问题,换过引物也那样请问哪位大侠知道原因啊? pcr为什么要扩增,PCR的目的是获得目的基因片段?但为什么要扩增很多次呢,小菜题不懂.为什么要大量呢 PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在100-120BP长度,那该如何.模板比理论上要扩出来的目的片段长度还短,怎么解决 关于PCR的扩增问题您好,请问你的1200bp的目的片段,后来是怎么调整反应体系,得到结果的? 基因的PCR扩增与人工合成问题?如果目的片段比较短,小于50个bp,是采用PCR扩增还是人工合成呢? PCR扩增问题今天PCR,扩增的目的片段大概是1000bp,但是扩增出来的大概在2000bp左右,想问一下这个是什么原因,解决这个问题的方法是什么 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 小片段DNA(100-200bp)的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 胶回收:雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊?怎么知道目的片段的bp?不是目的片段的bp,图片中左边第一条是marker,第五第六条各有两条带,在1000 和1400的 PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物总是扩增不出来,目的片段279bp,我用的条件是94℃,5min;94℃,30s,50℃,30s,72℃,45s,30个循环;72℃,5min.其中退火温度有试过56℃,58℃,都不行,只有引 小片段DNA的PCR扩增程序我要扩的DNA片段138KB扩了很多次都没有扩出来,想问问大家,谁扩过这么小的片段,PCR程序是怎么设定的本人要扩增的是138bp的小DNA,怎么也扩不出来,不知道该怎么办.我的上 谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?还是就是引物片段?最终目的不是扩增目的基因,观察多态性的. 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? 反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp 我的目的片段有500bp,可我 不知道它究竟有什么酶切位点,我怎么样才可以知道?我的目的片段是cDNA, PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 . 菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?