您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 00:51:40

您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影
您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗
就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影响吗?如果有影响,如何排除?期待您的回答!

您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影
你刚连接完就来酶切检测?看看分子克隆的书啊,
连接产物先转化到大肠杆菌中,比如top10,让菌在LB agar plate上生长16hrs,然后挑取单克隆,在2ml LB中培养起来(8hrs),少量抽提质粒后再用限制性内切酶进行酶切检测,将含有正确重组质粒的菌大量培养,抽取大量质粒~
连接完就酶切,连接酶和限制酶会互相抑制,而且即使切开了,你跑胶也看不到的.

这个 你当百度里的都是生物学教授吗?教授都是抵制百度的 您这个太高端了 不如问问导师吧 既然是实验 就要实验嘛 不如取少量 做了试试

应该没有影响吧

我不知道还有这样做的哦,应该是连接之后,先做转化,然后再LB培养基上培养,挑菌进行摇菌,然后鉴定,是阳性的提质粒,然后酶切鉴定。

楼上说的都基本正确,一般不会连接完直接作酶切。因为连接体系量太少,需要转化扩增,也方便鉴定和保存。
如果硬要直接酶切,我觉得肯定会有影响,至少也要抽提一下DNA再做下步反应

您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影 您好,将目的片段连接T载体后为什么要作感受态?目的是什么?T载体就是质粒吗,属性是什么? 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒 如何将目的基因和质粒结合成重组质粒 目的基因和载体的结合二者需用限制酶切割后变为重组载体,该过程与质粒上含有() 有关 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 目的基因片段与载体质粒的选择?多长的目的基因片段选什么样的载体质粒?这之间有些什么界限啊~哪个晓得回一哈下哦, 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 设计一个实验流程,把下面的目标基因重组转化到大肠杆菌中进行表达要求包括:质粒DNA抽提,限制性内切酶酶切,目的DNA片段分离、纯化,载体构建,重组DNA转化等主要步骤 真核重组质粒构建需要pMD18T载体么?我现在构建真核重组质粒,是合成引物,pcr出目的片段,目的片段的双酶切胶回收、pEGFP-C1质粒的双酶切胶回收,T4连接酶连接,转化,送去测序.想问下这步骤对么? 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 用相同的限制酶切割DNA分子和质粒后,用连接酶连接会有几种重组质粒形成?所谓重组质粒就是目的基因和质粒相连,我问的是有几种重组质粒形成。为什么老师说只有一种?为什么不是正向 基因表达载体和重组质粒的区别 用同种限制酶切质粒和目的基因DNA,连接后,产生的载体-载体连接物不是也有标记基因而且在培养基上生长吗怎么筛选这种呢? 人工合成的基因的途径一般有哪些2、如何将目的基因和质粒结合成重组质粒 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么:经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 如何将两个外源基因导入到一个质粒载体?有一段平末端编码人VEGF基因的DNA片段,怎样将其插入到含有EcoRI和BamH I限制位点的PET28a载体中去?插入后重组载体转化大肠杆菌DH5.我们要插入这个外源