PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 16:42:58

PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?
PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?

PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?
浓度不是问题,关键是你要加入足够量的DNA.具体来说,载体与目的片段的摩尔比要为1比3到1比10.一般市场上的T载体大约是0.03pmol/ul的浓度,也就是说你要加入0.06-0.3pmol的插入片段.对于1000bp左右的线性DNA分子,0.3pmol时的量约为200ng.目的片段浓度太低的话,你可以扩大连接体系来做.

一般回收后取1微升产物电泳能看到明亮清晰的带,这时的量就足够。

PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做? 我做TA克隆,准备拿序列去测序.做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比较单一且比较亮.但老师说要蓝白斑筛选重组子.IPTG和X-gal.因为我 请问一般切胶回收中跑电泳用的PCR液要多少ul? 克隆后菌液可以保存几天还能测序?我的pcr产物胶回收后进行的TA克隆.最后用摇出来的菌液重新pcr觉得效果比较好.想拿菌液直接测序.我想知道菌液是四度短期保存么?保存多久之内可以不至于 DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?菌落PCR之后进行胶回收的!亮的两条带是回收之前,其他都是回收之后电泳结果. PCR扩增目的基因以后,怎么用琼脂糖电泳回收及纯化呢?希望高手指教! 电泳切胶回收点样多少? 电泳切胶回收点样多少? pcr后电泳的目的是?pcr 回收产物再做电泳的目的是? PCR产物电泳做胶回收不也得到纯化的目的?PCR产物纯化试剂盒的好处是什么?不用让目的条带染上EB?还是更加快捷?请给出权威回答 不要猜测的答案 RNA电泳与PCR电泳所用的胶有何不同 为什么胶回收试剂盒回收的DNA电泳后一点东西都没有 胶回收后的产物电泳跑不出,排除浓度太淡,还有什么原因呢可能还是浓度太淡了,我用的是3%的胶,最后胶回收的产物跑不出电泳,但是后面的T-A克隆连接,我加得很多,也还是连接成功了。 PCR产物回收后不纯,可以再接着用回收产物跑胶回收吗?请高手赐教, 胶回收:雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊?怎么知道目的片段的bp?不是目的片段的bp,图片中左边第一条是marker,第五第六条各有两条带,在1000 和1400的 PCR后进行DNA电泳跑胶得到那些条带是什么意思怎么看具体? TA克隆时,如何选择T载体?在三博克隆测序,PCR产物长度只有85bp,选择什么样的T载体比较好呢? 怎么回收pcr产物