为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 14:08:11

为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和

为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和
不知道具体的情况是什么,只能有几种猜测:
1.有些DNA MAKER的质量不是很好,略微的偏差是正常的.
2.电泳时质粒的状态对最后的结果有很大的影响,双螺旋闭环的质粒电泳时跑得快,比实际偏小,而提取质粒时裂解过了的质粒会开环,此时电泳结果与实际大小差不多.所以要电泳得到正确的质粒大小,最好单酶切.
3.如果载体酶切的粘末端一致,很有可能造成载体自连,两个载体连在一起,或者插入载体的目的片段非单拷贝,虽然这两种情况发生的概率非常小.
建议:
1.酶切验证.
2.实在不放心可以送出去测个序

质粒作为转基因的载体,在形成转基因载体之前,都会被DNA剪切酶剪切,使其形成能够接受目的基因的片段,而目的基因都是小于被剪去的片段的,所以原来的质粒会大于目的基因片段和载体的和。

说得具体一点呢

为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和 提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒 基因工程中为什么用两种酶切质粒和带有目的基因的dna片段?用一种酶切会怎么样? 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 目的基因片段与载体质粒的选择?多长的目的基因片段选什么样的载体质粒?这之间有些什么界限啊~哪个晓得回一哈下哦, PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 载体和质粒的区别?载体与质粒的概念有什么不同? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影 高中生物 质粒基因工程中为什么质粒有抗病基因那么改质粒进入细胞后细胞就能抗该病,质粒是目的基因载体,它和细胞是两个分开的个体,难道质粒进入细胞后就被细胞同化了,一个质粒只能 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 载体和目的片段连接目的片断与载体的摩尔比大于3-10:1.摩尔数怎么确定?除了用分光光度计测OD,同门说跑胶能估算,请问怎么估算?这个比例对结果影响很大吗? 如何根据电泳图确定载体和目的片段的加入量 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么:经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 基因表达载体和重组质粒的区别 染色体和质粒都可以作为基因工程的载体么 目的基因和载体的结合二者需用限制酶切割后变为重组载体,该过程与质粒上含有() 有关