自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 19:04:34

自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题?
自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题?

自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题?
可能是模板结构问题,多试几种PCR试剂,个人觉得Takara的LA扩增能力比较强

你看你的基因的GC含量了吗?太高了也不好扩.
还有,你的模板是什么?是已经构建好了的质粒,还是cDNA你要调取基因?
你可以把你的问题提得细一些.

你说具体点,用什么软件设的引物,扩啥基因。。结果如何。好分析,这样问太泛了。
可能是退火温度不合适,试一下做梯度PCR

模板浓度过高也不容易出结果 ,建议试试稀释模板

同学,这个问题我不知回答过多少次了,每次都是跟没回答一样,同学,P不出来很正常,有无数无数的原因都会导致P不出来,小到基因相互作用,大到引物失效,甚至电泳操作失误,甚至EB过期,甚至电极放反,种种种种的可能了。同学,我建议你平行试验三次,如果还没有,再来问。电泳操作失误,甚至EB过期,甚至电极放反,这些都可以排除,我克隆的基因是大约400bp,电泳时只能看到,在六七十bp处有隐约条带,估计是引物二...

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同学,这个问题我不知回答过多少次了,每次都是跟没回答一样,同学,P不出来很正常,有无数无数的原因都会导致P不出来,小到基因相互作用,大到引物失效,甚至电泳操作失误,甚至EB过期,甚至电极放反,种种种种的可能了。同学,我建议你平行试验三次,如果还没有,再来问。

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自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题? 关于PCR克隆基因的引物问题想拿到一个基因的CD区,CD区一共1400bp,用引物A(上游引物),B(下游引物)扩出了1-1200bp前面一段,引物C(上游引物),D(下游引物)扩出了1000-1400bp后面一段,可是用A 普通PCR和基因克隆PCR的引物设计有什么不同和注意事项? 为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?如题.设计表达引物有什么要求吗? 设计引物如何保证基因完整PCR的产物只是基因的一部分啊,如何设计一对引物保证基因完整. 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 试根据一段序列设计一对pcr引物,并在两端加上两个限制性酶切位点这是老师给的考试题库,题目就是这个了。 引物的设计 PCR扩增 连接 转化 这一系列是什么的步骤 基因克隆吗?那引物是干嘛用的 您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带? 如何设计随机引物我是想克隆一段 已经转入水稻基因组的 外源基因。打算设计一对引物 其5‘端使用随机引物,中间用特异性内切酶序列,3’端使用已知目的基因两端序列。(因为完全使 我的目的基因目前只知道部分序列,现在需要克隆出这个基因全长来,我已经合成了RACE模板及引物,进行了PCR,一直没有出来目的条带 我要进行PCR扩增,自己不会设计引物,主要是primer不太会用.打算引用国外文献上的引物设计,但是同一个基因,PubMed上不同文献有不同的引物设计,目前该基因我已经发现了好几种版本的引物设计. 如何设计巢氏PCR的第一对引物 求助保守序列查找,引物设计最近老师给了一个基因,只知道名称,让我们自己摸索,设计引物,做克隆.菜鸟一只,完全不知怎么做,希望有前辈帮帮忙,给个指导, RT-PCR的引物如何设计?本人刚接触RT-PCR,需要从其它几个物种基因的保守序列中,设计出另一个物种这个基因RT-PCR引物,但是实在是一头雾水, 一段目的基因,帮忙设计引物.ACATGATTACGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTGAATGCCATGGTGATGGGAGGTAGTCTGGATGGAGATTGGCAGAAATGTTCAGCAACCTTTGACTGCAGTGAACGGGCTGTACAGGGTTATATGGCACGGTACGCAACCTATGCCCGTCTAGAGCATAATCCTACCTGTGAGGATTTTGCGCGGATACACAACGG 设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因 pcr引物怎么设计