实际在做PCR时需要加入哪些组分?各组分的浓度如何确定

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/05 19:32:18

实际在做PCR时需要加入哪些组分?各组分的浓度如何确定
实际在做PCR时需要加入哪些组分?各组分的浓度如何确定

实际在做PCR时需要加入哪些组分?各组分的浓度如何确定
dNTP,含镁离子的 PCR buffer,上游引物,下游引物,taq酶,模板DNA.至于浓度,实际上说明书上都写着有,市售的taq聚合酶都带有10X的含镁离子的PCR buffer,这个使用时稀释10倍就可以保证浓度了,也就是说50ul的反应体系加入5ul.dNTP的话一般是50ul的反应体系加入4ul 2.5 mM的dNTP.引物的浓度一般是每50ul反应体系加入上下游引物各1ul浓度为20uM左右的引物储存液.酶的话还是看酶的说明书,一般taq聚合酶的推荐是每50ul加入2.5个酶单位左右.模板DNA要根据模板DNA的大小来确定加入浓度的,一般模板DNA片段越小加入的量就越小,反之越大.但总50ul反应体系中,最多不要超过10ug左右.

这个要多实际啊……实验室情况的话就是buffer, primer, DNA template, DNA polymerase, dNTP，浓度按照试剂公司protocal来。理论的话建议你看一下molecular cloning，里面讲的挺详细的，就是有点老，不同实验条件不一样

矮油你好像是园艺的吧。。。。

哎呦，又来个园艺孩子

这还有个园艺的

我只是来顶楼上
你把分给一楼吧，答得不错

咋都是园艺的，咱也是

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