PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?希望能稍微介绍一下这两种PCR的原理

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/27 16:29:44

PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?希望能稍微介绍一下这两种PCR的原理
PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?
希望能稍微介绍一下这两种PCR的原理

PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?希望能稍微介绍一下这两种PCR的原理
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右）,DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.
实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.
普通PCR和实时荧光定量PCR的不同,是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Green 或Taqman 探针等等）.以SYBR Green为例,这种染料可以结合在双链的DNA上,当PCR不断进行时,每一次退火生成的双链DNA也在增加,荧光染料结合也越多,荧光也越强.在机器中有一个探测荧光的探头,可以定量检测荧光的强度,转换成数值.这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况.

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