怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 05:29:23

怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性?
怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性?

怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性?
首先看你是否使用蓝白斑筛选,如果使用了白色菌落就行了,但是x-gal比较贵,所以很多实验室都不用,而用菌落PCR.首先配制clonebuffer,每400微升含EXtaq buffer 40微升,Mgcl2 32微升,水328微升.加clonebuffer 5微升入PCR管,用牙签挑取菌落在buffer里粘一下,一般我每个板做个5到10个,98度处理15分钟,然后再按照PCR体系配制剩下的溶液,使终浓度达到PCR体系要求,用载体引物做PCR就好了,看条带大小,希望有帮助

怎样鉴定大肠杆菌质粒转化后获得的菌落是否为阳性? 质粒转化大肠杆菌后涂平板长出的菌落出现较规则的大小两种菌落 可以继续进行质粒提取吗? 为什么大肠杆菌经过质粒转化后铺板后生长的菌落大小不一致,而且是有规律的出现两种大小不一样的形态. 质粒转化大肠杆菌的目的? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 大肠杆菌转化后长得很慢,提质粒跑电泳条带很淡我是用的一种基因缺陷性大肠杆菌做感受态,然后将连接好的质粒转入(连好的质粒里含有缺少的基因片段),涂平板以后需要24h才有菌落长出,挑 Clontech试剂盒的质粒如何长期保存?是转化大肠杆菌后保存含有质粒的菌种吗?还是转化酵母? 请问 大肠杆菌菌落、普通变形杆菌菌落、粘质沙雷菌菌落 三种菌的菌落是否透明? 用氯化钙制备感受态细胞的做转化后一个菌落都张不出的原因 我是按照文献步骤做的呀1、 取大肠杆菌原始菌株(无外源质粒)单菌落接种于5mlLB培养液中,37℃,摇荡过夜;2、 取1ml过夜培养 (鉴定质粒表达)比较菌落PCR和提质粒酶切这两种方法的优缺点,为什么需要两次鉴定? 我的片段转入ppicza载体后转化到DH5a里,菌落PCR验证成功,为何就是提不出质粒? 导入含有目的基因的质粒的大肠杆菌繁殖后 后代是否含有目的基因? 大肠杆菌的菌落特征 举一个例子:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得 双酶切连接后转化,长出了菌落,但提质粒跑电泳,分子量比目的质粒大很多,为什么 转化大肠杆菌平板出现卫星菌落是怎么回事 根瘤农杆菌感受态制作时污染是怎么回事?转化质粒进去后,长出后是白色不透明的菌落,都不像是农杆菌. 重组质粒转化大肠杆菌注意事项(用热击法).