作业帮岛津的高效液相色谱色谱仪用了一年了,重复性现在不是很好,什么原因?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 21:43:39
岛津的高效液相色谱色谱仪用了一年了,重复性现在不是很好,什么原因?
岛津的高效液相色谱色谱仪用了一年了,重复性现在不是很好,什么原因?
岛津的高效液相色谱色谱仪用了一年了,重复性现在不是很好,什么原因?
有色友经常反映说,样品或者标品的重现性不好,下面本人根据自己的经验把原因和处理方式给大家分享一下.
不要笼统说重现性不好,要细分两种情况：单独样品重现性不好；样品和标品的重现性不好.
（一）如果单是样品的重现性不好而标品的重现性可以的话,原因比较容易分析.问题可能出现在样品本身上.
1）样品降解或者分解,当你的样品在稀释液中不稳定,这种情况是很有可能发生的.解决办法：改变稀释溶液,要是遇水
分解的流动相中不能有水,必要时还等改用正向色谱.
2）样品溶解时间不足.比如当你进第一针时候假设样品溶解率为90%,后一针为95%,以后随着时间延长而增加,这样
你重现性肯定不好.这种情况的判定比较简单,不要肉眼看容量品是否有不容物,你的眼睛没有那么高的分辨率,只要把
容量瓶超声一下,看看超声前后的对比就可以判断.如果是这种问题,解决方法简单,在处理样品时加入少量的易容溶
剂,超声5秒左右,再用你的稀释液定容,一般就可以解决.
3）样品称量问题.当你做同一容量瓶的样品取得很好的重现,而在同一样品不同容量瓶中存在重现不好的情况.可能就是
你的称量中出了问题.具体哪里的问题,我没有肯定的答案,但是可以肯定的是,你必须要重新称量,并复检,按着要求
可是要加倍复检的,所以每次称量你都必须小心.此外,还可能是容量瓶本身不准,不过这个可能性比较小,建议用
100ml容量瓶.因为容量瓶越小误差越大,这点我做过验证的,在国内可以作为“真理”.真理就不要在耗时费事验证
了.
（二）样品和标准品同时出现重现性不好的情况.
这种情况比上一种可能要稍微复杂一些.但是也比较好分析.
首先,不要笼统说重现性不好.也有两种情况,一是保留时间较好,只是响应值不好；二是两者都不好.
如果是第一种情况,请参考（一）中的分析,这里不赘述.
如果保留时间和响应值都不好可能的原因如下：
1）柱温的影响.柱子温度和保留时间的关系,一般是反向的,即柱温越高保留时间越短,反之亦然.但是柱温不仅会对保
留时间有影响,还会影响响应值也就是峰面积.一般来讲保留时间提起会使峰宽变小和峰高变大,但他们两者的对于峰面
积的作用一般不会正好抵消,也就是说面积有所变化的.所以,柱温箱是必要的.如果你还没有赶快和老板说,如果不给
买,就说是我说的.哈哈!
2）流速和柱压的问题.首先要知道在液相色谱中是用流速控制柱压的,流速你要设定的,而柱压是配合你的流速仪器自行
控制的.柱压是流速的因,流速是柱压的果.当你系统正常运行时突然柱压降低,这个时候流速会突然降低,样品的保留
时间会延后,当然也就造成重现性的不好了.还有柱压波动较大的时候,也不会有好的重现性（保留时间和响应值）.
的.
3）其他比较少见的情况.灯的能量不足.表现为,保留时间可以,但是响应值逐渐降低.解决办法：换灯.说实在的这种
情况比较少见,至少我没有遇到过.有些色友在分析类似的问题时上来就说人家的灯可能不行了,我觉得这是很站不住脚
的一种说法.首先氘灯的平均使用寿命为3000小时,每天8小时的话可以用375天（一年半使用时间）,也就是说这种情
况如果成立的可能性为1/375,而且未必成立.其次,一般仪器开机时都有自检的（国产仪器我不清楚,至少waters和
agilent是有的）,自检通过了一般工作1天是一点问题都没有的.我曾经在自检初次通不过情况下使用半月也没有问题
（一次不通过,关机,停一会再开机）.第三,我认为灯能量的衰减速度是随着你灯能量降低而降低的.这个是我个人的
观点.好比100元的股票每天跌10%,第一天下跌10元,第十天下跌多少我就不算了,反正比10元少很多.扯远了,这
个观点套用到这里就是,灯的能量低事实,不支持短短一天时间内重现性不好这个现象,也可以近似说等能量低与检测重
现性不好无关.看似比较矛盾,我的论据在反对我的论点.但是我想这就是我的态度,因为这种情况我没有遇到过,而我
推论也仅仅是推论,加之有的色友一再强调,未免心虚,故而矛盾一把吧.