PCR产物克隆用pMD19连不上,可以用pGEM-T Easy吗

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 20:50:03

PCR产物克隆用pMD19连不上,可以用pGEM-T Easy吗
PCR产物克隆用pMD19连不上,可以用pGEM-T Easy吗

PCR产物克隆用pMD19连不上,可以用pGEM-T Easy吗
做TA克隆吗?确定你PCR的时候用的扩增酶会在末尾加A,一般高保真酶都不会加A,也就不能用T载体连接了.另外还要考虑PCR片段太大会影响连接效率,还有片断和载体的摩尔比也有影响.
pMD19-T和pGEM-T Easy没有原理上的差别,当然考虑到可能是载体放久了出问题或者2X的ligation buffer出问题之类,还是值得换一下试试看的.另外invitrogen有一种做TA克隆的载体是利用拓扑异构酶的,如果你的PCR产物真的比较难做TA克隆也可以试一下.

PCR产物克隆用pMD19连不上,可以用pGEM-T Easy吗 简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理 我们机构想使用博凌科为的pSURE-T 载体连接试剂盒,据说可以简化PCR产物的克隆,用过的给我介绍下 用PCR合成DNA属于克隆吗 克隆后菌液可以保存几天还能测序?我的pcr产物胶回收后进行的TA克隆.最后用摇出来的菌液重新pcr觉得效果比较好.想拿菌液直接测序.我想知道菌液是四度短期保存么?保存多久之内可以不至于 为什么用RNA为模板,以基因组设计引物可以PCR出产物用DNaseI处理后,还是可以PCR出产物,请问还有其他原因吗? PCR产物可以直接测序吗 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引 PCR产物回收后不纯,可以再接着用回收产物跑胶回收吗?请高手赐教, 要克隆一段基因,什么情况用PCR,什么情况用重组质粒分子克隆法? 分子生物学实验当中,为什么都是用PCR仪器来克隆DNA?为什么要克隆? pcr产物分离问题1.PCR产物中分别有360bp和340bp的产物,能用琼脂糖电泳使它们分开吗?如果可以用多少浓度的胶和多大的电压进行呢2.PCR产物中分别有1120bp和1100bp的产物,能用琼脂糖电泳使它们分 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con 为什么卡那霉素抗性基因大多用于植物转基因,动物转基因可以用它吗我做鱼生长激素克隆,要将cDNA的PCR产物转到大肠杆菌中保存,用卡那霉素筛选好还是利用Amp / IPTG/X2Gal平板上进行蓝白斑筛 pcr产物用聚丙烯酰胺电泳时加上样缓冲液是什么? 模版DNA浓度低怎么办 假如用PCR产物再做一次PCR 那PCR缓冲液那些是一样的嘛 如何稀释一次PCR产物 是用pcr缓冲液buffer吗 PCR产物用什么方法纯化我要做RFLP,PCR后要做酶切,请问用什么方法纯化PCR产物比较好呢?