荧光定量PCR步骤

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/27 17:15:47

荧光定量PCR步骤
荧光定量PCR步骤

荧光定量PCR步骤
博凌科为-为你如果lz确实已经确定该基因SNP位点以及突变型,你可以选择荧光定量PCR进行检测,检测方法是：1、探针设计在突变位置,有几个突变点设计几个（不同突变型需要不同的荧光标记：例如,野生型探针用FAM、其中一个突变点探针用VIC或者HEX、另外的一个突变探针用TET等等）；2、然后在突变点两端设计引物（大概100－150bp就可以了.如果用MGB探针,可以小于100bp）；3、然后就是用能进行GenoTyping的荧光定量PCR仪器了（ABI的7700、7900等都可以）；实验操作么就是常规的荧光定量（Realtime）＋读取分型（Allelic Discrimination）两个操作,按照不同PCR仪器的说明书操作即可；4、分析,就可以用软件分析扩增曲线和分型图谱,两者联合判断该样本的基因型就好了.

首先确定你的试验方法，是用荧光染料还是探针，确定之后，设计引物（如果用探针，还要设计探针），然后确定你的实验方案，是否做梯度，是否做重复，是否有待优化等等，然后根据设计加入体系，然后PCR仪进行运行，分析结果。

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