提高原生质体提取效率我看过Sheen实验室的protocol了,手法很细致但有些繁琐.我现在可以提取出原声质体,但许多细胞都破裂了.我想请问一下,酶液是必须现用现配吗?用CPW洗涤原生质体时如果用

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 17:07:53

提高原生质体提取效率我看过Sheen实验室的protocol了,手法很细致但有些繁琐.我现在可以提取出原声质体,但许多细胞都破裂了.我想请问一下,酶液是必须现用现配吗?用CPW洗涤原生质体时如果用
提高原生质体提取效率
我看过Sheen实验室的protocol了,手法很细致但有些繁琐.我现在可以提取出原声质体,但许多细胞都破裂了.我想请问一下,酶液是必须现用现配吗?用CPW洗涤原生质体时如果用枪头反复吹吸会引起原生质体破裂吗?

提高原生质体提取效率我看过Sheen实验室的protocol了,手法很细致但有些繁琐.我现在可以提取出原声质体,但许多细胞都破裂了.我想请问一下,酶液是必须现用现配吗?用CPW洗涤原生质体时如果用
酶液必须现配,放置时间久会影响酶解效果,并且容易长菌胁迫原生质体.
千万不能用枪头吹打,洗涤时用手指轻拨即可,吸取时要用剪过头的枪头.
解决破裂问题除了上面提到的,还要注意如果用到离心机的话,离心力最好不要超过100g,brake不要超过5(brake 就是BECKMAN离心机面板上的ACC/DEC).