碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?取菌的时候是在酒精灯旁进行的无菌操作,两次离心都是12000转12分钟,最后在跑琼脂糖凝胶电泳时有EB显色时有拖尾现象,是不是被降解了,可能

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 14:31:43

碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?取菌的时候是在酒精灯旁进行的无菌操作,两次离心都是12000转12分钟,最后在跑琼脂糖凝胶电泳时有EB显色时有拖尾现象,是不是被降解了,可能
碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?
取菌的时候是在酒精灯旁进行的无菌操作,两次离心都是12000转12分钟,最后在跑琼脂糖凝胶电泳时有EB显色时有拖尾现象,是不是被降解了,可能的原因有哪些?整个提取过程中还有没什么需要注意的地方?

碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?取菌的时候是在酒精灯旁进行的无菌操作,两次离心都是12000转12分钟,最后在跑琼脂糖凝胶电泳时有EB显色时有拖尾现象,是不是被降解了,可能
还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了,浓度越高,分子筛效应越大,质粒又比较大,当然容易拖尾了.其次也可能是你的电泳电压过大;还有就是RNA污染,你提完质粒后没有用RNase降解,不过这就不叫拖尾了,称作有杂带.
至于注意事项,你搞清每一步的原理后自己仔细想想就知道了.时刻记住不要让质粒因为机械损伤而打断,不要让质粒被降解,尽量除去质粒内残存的乙醇,因为这会对接下来的酶切造成很大的影响.

RNA污染吧,用没有RNase水?

碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些?取菌的时候是在酒精灯旁进行的无菌操作,两次离心都是12000转12分钟,最后在跑琼脂糖凝胶电泳时有EB显色时有拖尾现象,是不是被降解了,可能 碱裂解法提取质粒后 电泳拖尾严重,是什么原因?提取质粒时 有用RNase处理 碱裂解法提取质粒过程溶菌酶的作用 碱裂解法提取的质粒DNA琼脂糖凝胶电泳应该是什么样的? 酵母质粒DNA是否也能用SDS碱裂解法提取 在用碱裂解法提取质粒的过程中除质粒以外的DNA和RNA是怎么除去的碱裂解法提取质粒的原理是什么 SDS碱裂解法质粒DNA小量提取最近在做质粒DNA的提取,做到最后,加入TE还有不容的沉淀,请高手指导一二, SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后为什么溶液会变三层?那三层分别是什么?及离心的作用是什么? 用碱裂解法提取的质粒DNA通常都污染有细菌RNA分子,你采用什么策略能够去除RNA污染? SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后加异丙醇的作用?SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿离心后为什么加异丙醇,即异丙醇的作用是什么?还有加了后还要静置10分钟,这又是为什么? 碱裂解法提取质粒过程中,EDTA、溶菌酶、NaOH、SDS、乙甲酸、酚/氯仿等试剂的作用是什么? SDS碱裂解法提取质粒DNA中加酚氯仿的作用是什么?SDS碱裂解法加完溶液3后为什么还要加酚氯仿?它的作用主要是怎样的?及它是怎样配置的? 分析碱裂解法提取的质粒DNA电泳图,M:Puc19质粒作为Marker,泳道1、2、3、4都跑出两条带分别是什么?哪一条带是双螺旋DNA?另一条是什么变性超螺旋质粒还是开环DNA? 裂解发提取质粒DNA溶液SDS为什么底部有沉淀 影响质粒DNA提取纯度的原因? 大肠杆菌DH5α有质粒吗我们做了SDS裂解法提取大肠杆菌DH5α中的基因组DNA的实验,我想问一下,这个菌株中没有质粒DNA的干扰吗? SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用是什么?想知道溶液1的成分及其作用!溶液2,溶液3也想知道! 质粒提取I 液 缺少RNA酶 会有什么现象我用的是碱裂解法.若果不加RNAase 会对下游操作和结果产生怎样的影响?在哪一步会有异常现象出现?