作业帮抗体人源化步骤最好能举例说明,具体点,知道可能会很多很复杂,所以悬赏也高能说多少算多少我现在用的不是校园网，没的下2楼说的太泛了，我以前看过~起码要说下怎么克隆吧就是要三楼
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/10 07:03:35
抗体人源化步骤最好能举例说明,具体点,知道可能会很多很复杂,所以悬赏也高能说多少算多少我现在用的不是校园网，没的下2楼说的太泛了，我以前看过~起码要说下怎么克隆吧就是要三楼
抗体人源化步骤
最好能举例说明,具体点,
知道可能会很多很复杂,所以悬赏也高
能说多少算多少
我现在用的不是校园网，没的下
2楼说的太泛了，我以前看过~起码要说下怎么克隆吧
就是要三楼那样的，再具体下酒OK啦，就说嵌合抗体就好了
是要吊基因吗，吊出mRNA后然后呢，主要能让人明白个程序不糊里糊涂就行
抗体人源化步骤最好能举例说明,具体点,知道可能会很多很复杂,所以悬赏也高能说多少算多少我现在用的不是校园网，没的下2楼说的太泛了，我以前看过~起码要说下怎么克隆吧就是要三楼
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摘 要:目的在人源化抗体构建过程中,采用方便、快捷的分子克隆手段.消除SP2／0内源性畸形轻链转录本以获得正确的轻链cDNA.方法在mRNA抽提时,不用常规的TRIZOL法抽提总RNA,而采用经腹腔培养.生长状态良好的杂交瘤细胞.用QIAGEN公司Oligotex Direct mRNA Purification Kit,将polyA^＋的mRNA富集.可有效减少畸变转录本的含量,提高功能型mRNA的丰度.利用polyA^＋RNA.采用RT-PCR,我们成功地克隆到了轻链可变区序列,序列分析证实读码框完全正确,属于轻链可变区基因.结果NCBI数据库BLAST显示.克隆的基因序列符合小鼠lg可变区特征,具有正确的CDR和FR功能区及VJ连接区.结论采用polyA^＋ mRNA富集技术,成功克隆获得阻断型抗人CD154 mAb（4F1）单克隆抗体的轻链、重链可变区基因,成功地消除了SP2／0内源性畸形转录本对免疫球蛋白功能性轻链基因的影响.
（一）嵌合抗体
方法：
从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区基因连接，插入适当表达载体，转染宿主细胞，表达人-鼠嵌合抗体
特点：
减少了鼠源性抗体的免疫原性
保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力
（二）改型抗体
定义：指利用基因工程技术，将人抗体可变区（V）中互补决定簇（CDR）序列改换成鼠源单抗CDR序列。重构成既...
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（一）嵌合抗体
方法：
从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区基因连接，插入适当表达载体，转染宿主细胞，表达人-鼠嵌合抗体
特点：
减少了鼠源性抗体的免疫原性
保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力
（二）改型抗体
定义：指利用基因工程技术，将人抗体可变区（V）中互补决定簇（CDR）序列改换成鼠源单抗CDR序列。重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体。RAb亦叫“重构型抗体”，因其主要涉及CDR的“移植”，又可称为“CDR移植抗体
意义：多种特异的鼠源单抗有可能应用于临床治疗
好吧，解释一下，所谓嵌合抗体，就是利用DNA重组技术将鼠单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达出人鼠嵌合抗体，这样表达的抗体分子中轻重链的V区是鼠源的，而C区是人源的，这样整个抗体分子的近2／3部分都是人源的，大大降低了原有单抗中鼠源蛋白的免疫原性。
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